免疫印跡(Western Blot)
免疫印跡(Western Blot)是一個用于蛋白質分析的常規技術,根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法,用于檢測經電泳或斑點雜交后固定于膜上的蛋白質的檢測, 從而定量或定性的確定正常或實驗條件下細胞或組織中目標蛋白的表達情況。此外, 還可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后續分析,作為一種廉價、便捷、可靠的研究工具。
影響免疫印跡成敗的一個主要因素是抗原分子中可被抗體識別的表位性質。因為涉及到抗原樣品的變性,只有那些識別耐變性表位的抗體可以與抗原結合。多數多克隆抗體中或多或少含有這種類型的抗體,所以在免疫印跡中常選用多克隆抗體。第二個影響因素是蛋白原液中抗原的濃度。一些表達量低的蛋白在免疫印跡前常需要通過免疫沉淀,亞細胞分離等手段富集。第三影響因素是檢測體系中的各種試劑。抗體與抗原結合后,再加酶標二抗則形成抗原、一抗和酶標二抗的三元復合物。選擇一種恰當的底物與三元復合物孵育,最終顯色形成肉眼可見的沉淀線或發光后由X光片或CCD采集到光信號。特異、穩定的液態酶標抗體和相應的底物,保證了快速、準確、靈敏的檢測。
我公司經過不斷的優化和改進,積累了大量的經驗,并選用了目前市場上質量與口碑最好的NC 膜和化學發光底物,為您提供高效、靈敏、穩定的全套免疫印跡(western blot)技術服務。
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服務編號:YKSO-008
服務內容:
檢測組織/細胞在不同狀態下目的基因表達差異,包括:從細胞或特定組織中提取總蛋白質;用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離復雜蛋白樣品;轉膜;雜交:鑒定膜上的特定蛋白;顯色或顯影(化學發光法)。
1. Western實驗設計,與客戶溝通認可后執行
2.根據實驗設計完成Western實驗
樣品要求:
A.樣品包括細胞或組織的裂解液,裂解液濃度須大于2mg/ml,每張膜需要裂解液500ug
或提供下列材料:組織: 200-400mg ;細胞:約 10 7 細胞;蛋白: 1mg
B. 抗體:
a. 您提供符合技術要求的濃縮或即用型一抗;
b. 我們也可以為您代購抗體或者定制抗體(詳細情況請見抗體定制服務)
實驗標準:
內參抗體或Tag抗體條帶清晰,位置正確.
交付材料:
詳細的實驗報告
電話:021-58955621
咨詢:youke_sh@sina.com
地址:蔡倫路720號1號樓339室